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CTAB裂解液(RNase free)
产品编号 : RARP061
描述 :
规格 : 500mL
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RARP061 500mL
¥380.00

产品简介:

CTAB(hexadecyItrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。CTAB抽提法是经典的植物DNA提取法,也可用于多种植物样品RNA的提取。

 

保存条件:室温,1年有效。

 

操作流程(仅供参考):

1.配置CTAB裂解工作液(RNase free):按照CTAB裂解液(RNase free):2-ME=100:2的比例,临用前进行配置;

2.液氮研磨100mg 左右植物组织,转移到 1.5mL 离心管中,加入65℃预热的750uL CTAB裂解工作液(RNase free),涡旋振荡混匀后65℃温浴20min;

3.加入与CTAB裂解工作液(RNase free)等体积的水饱和酚,震荡混匀,4℃,12000rpm,离心10min;

4.取上步离心管中上清液到新的RNase free离心管中,加入加入与CTAB裂解工作液(RNase free)等体积的氯仿:异戊醇(24:1)混匀,4℃,12000rpm,离心10min;

5.取上步离心管中上清液到新的RNase free离心管中,加入上清体积的0.5倍体积的氯化钠(5moL/L, RNase free),摇晃混匀,再加入上清体积的0.5倍体积的氯仿,震荡混匀,4℃,12000rpm,离心10min;

6.取上步离心管中上清液到新的RNase free离心管中,加入等体积的异丙醇,温和混匀后,室温放置10min;

 

7.4℃,12000rpm,离心10min,小心弃掉上清液,加入1mL的75%乙醇(RNase free),混匀后,4℃,12000rpm,离心1-2min

8.小心弃掉上清液,干燥5-10min(可根据实际情况进行调整),加入30-50uL DEPC水进行溶解;

9.加入DNaseⅠ(10U/uL)1uL,37℃温浴30min。加入100uL DEPC水稀释后。再加入等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提一次,4℃,12000rpm,离心10min;

10.吸上清,加入1mL无水乙醇,-20℃静置2h,4℃,12000rpm,离心10min;

11.弃上清,加入1mL的75%乙醇(RNase free),混匀后,4℃,12000rpm,离心10min

12.小心弃掉上清液,干燥5-10min(可根据实际情况进行调整),加入20uL DEPC水进行溶解,并置于-20℃保存;

 

注意事项:

1.2-ME有一定的挥发性,用完应立即拧紧瓶盖

2.CTAB裂解工作液(RNase free)需现配现用,不应提前配置,根据用量进行配置

3.仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

4.为了您的安全和健康,请穿戴好个人防护装备和服装进行操作。

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说明书
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