Western Blot 基本原理及解决方案

为什么同样的蛋白使用EZBiolab 预制胶得到蛋白分子量和使用Tris Glycine胶得出的结果可能会不同？

首先采用SDS Page测定蛋白分子量是一个比较粗犷的方法，本身就会有误差。 

用塑料做的胶盒，要问是否对塑料表面进行了处理

答案：塑料属于有机材料，对蛋白有吸附作用。如果没有对塑料表面处理，在电泳过程中蛋白将不断被吸附在塑料胶盒面上。 蛋白越跑越少，以致于一些小蛋白根本看不见。 这对胶的检测灵敏度有根本性影响。 国产塑料胶盒预制胶均未对表面进行处理。

动物试验研究发现，丙烯酰胺可致大鼠多种器官肿瘤，包括乳腺、甲状腺、睾丸、肾上腺、中枢神经、口腔、子宫、脑下垂体等。国际癌症研究机构(IARC) 1994年对其致癌性进行了评价，将丙烯酰  胺列为2类致癌物(2A)即人类可能致癌物，其主要依据为丙烯酰胺在动物和人体均可代谢转化为其致癌活性代谢产物环氧丙酰胺。

缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应，正极发生的是氧化反应（4OH--4e->2H2O+O2)，负极发生的是还原反应（4H++4e->2H2)，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力，使溶液两极的pH保持基本不变。 

多克隆抗体（多抗）能识别任一抗原上的多个表位，而单克隆抗体（单抗）仅检测任一抗原上的一个表位（如下图）。但是多抗和单抗两者有着属于各自的优点和缺点。今天北京启维益成要给朋友们说的正是多抗和单抗的差异。